S., Ovi Erta Ria P. (2011) Kloning Gen CarB Salmonella Typhi Menggunakan Vektor Ekspresi pET-16b dan Sel Inang E.coli XL-10 pada Suhu Ligasi 16C 5 Menit. [Undergraduate thesis]
Preview |
PDF
F_3202_Abstrak.pdf Download (44kB) | Preview |
Abstract
Salmonella typhi merupakan bakteri yang dapat menyebabkan infeksi yang dikenal dengan nama penyakit tifus. Untuk mempelajari mekanisme patogenitas S. typhi pada manusia, Mekalanos et.al (1993) melakukan penelitian dan berhasil menemukan bahwa gen-gen pada bakteri S. typhimurium LT2 menyebabkan penyakit mirip demam tifoid pada mencit. Salah satu dari gen tersebut adalah gen iviI yang memiliki homologi dengan operon carAB Escherichia coli K12. Melalui pendekatan studi homologi tersebut, ditemukan struktur gen carA dan berhasil didapatkan produk hasil ekspresinya yaitu fusi potein carA. Gen carB yang saat itu sudah diketahui strukturnya telah berhasil diisolasi dari Salmonella typhi dan dikloning pada vektor pGem-T dengan sel inang E. coli XL-10. Untuk mempelajari fungsi dari gen carB dan mendapatkan protein carB, perlu dilakukan ekspresi dari gen carB. Usaha ekspresi dilakukan dengan mengkloning gen carB ke dalam vektor ekspresi pET-16b menggunakan sel inang E. coli BL21-DE3. Usaha kloning ini di awali dengan melakukan kloning gen carB pada vektor ekspresi pET-16b menggunakan sel inang E. coli XL-10, yang nantinya akan ditransformasikan ke dalam sel inang ekspresi E. coli BL21-DE3. Kloning dilakukan dengan cara meligasi vektor dan gen target pada suhu 16oC selama 5 menit. Pada penelitian ini, dari 101 koloni transforman yang tumbuh belum berhasil ditemukan koloni yang mengandung plasmid rekombinan pET-16b-carB. Disarankan untuk melakukan pengulangan kloning gen carB Salmonella typhi dengan meningkatkan perbandingan antara vektor (pET-16b) dan gen insert (carB).
| Item Type: | Undergraduate thesis |
|---|---|
| Uncontrolled Keywords: | Kloning Gen, Vektor Ekspresi, Sel Inang, Ligasi |
| Subjects: | R Medicine > RS Pharmacy and materia medica |
| Divisions: | Faculty of Pharmacy > Department of Pharmacy |
| Depositing User: | Karyono |
| Date Deposited: | 05 May 2014 11:13 |
| Last Modified: | 05 May 2014 11:13 |
| URI: | http://repository.ubaya.ac.id/id/eprint/12977 |
Actions (login required)
 |
View Item |
