Kloning Dan Ekspresi Gen Pengkode Enzim Selulase Dan Xilanase Dari Bacillus Subtilis Dalam Escherichia Coli

Wahjudi, Mariana (2013) Kloning Dan Ekspresi Gen Pengkode Enzim Selulase Dan Xilanase Dari Bacillus Subtilis Dalam Escherichia Coli. Project Report. Universitas Surabaya, Surabaya. (Unpublished)

Preview	PDF kloning dan ekspresi gen__2013.pdf Download (932kB) | Preview
	PDF kloning dan ekspresi gen._2013.pdf Restricted to Repository staff only Download (10MB) | Request a copy

Abstract

Kloning gen pengkode endo-1 ,4-beta-glucanase (ysdC) dan endo-beta-1 ,3-1 ,4 glucanase (BSUW23_ 10175) dan xylan beta-1,4-xylosidase (xynB) dari Bacillus subtilis subsp. spizizenii str. W23 telah berhasil dilakukan pada plasmid pMMB67EH ke dalam sel inang Escherichia coli DH-5a dan Escherichia coli Origami. Amplifikasi gen target dilakukan melalui PCR (Polymerase Chain Reaction) dengan pasangan primer spesifik forward-reverse untuk masing-masing gen target. Transfonnasi sel Escherichia coli DH-5a dan Escherichia coli Origami dengan plasmid pMMB-gen target dilakukan dengan metode heat-shock sel E. coli yang dibuat kompeten dengan CaCl2. Adanya aktivitas degradasi selulosa dan xilanase pada Escherichia coli DH-Sa dan Escherichia coli Origami dideteksi secara kualitatif melalui produksi kadar total gula reduksi pada substrat carboxymethyl cellulose atau melalui pembentukan zona bening pada mediium LB-xilan-IPTG (lsopropyi-P-D-thio-galactoside) dengan pewarna Congo red untuk deteksi enzim xilanase. Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa kloning gen ysdC pengkode enzim endo-1,4-f3-glucanase, BSUW23_10175 (pengkode enzim endo-f3 -1,3-1,4 glucanase), dan xynB (pengkode -xilanase dari B. subtilis spizizenii W23 ke dalam plasmid pMMB67EH dan transformasi sel E. coli DH5a dan/atau E . coli Origami dengan plasmid rekombinan telah berhasil dilakukan. Sel E. coli transfonnan yang membawa plasmid rekombinan (pMMB-ysdC, pMMB-10175 dan pMMB-xynB) mempunyai kemampuan memecah selulosa dan xilan pada kondisi ekperimental. Set E. coli transforman yang membawa plasmid rekombinan mempunyai aktivitas selulase atau xilanase lebih tinggi dibandingkan dengan aktivitasnya pada set E. coli yang membawa empty plasmid (pMMB67EH), sedangkan set B . subtilis subsp. spizizenii str. W23 asli mempunyai enzim ekstraseluler dengan aktivitas memecah seJulosa dan xilan lebih besar dibandingkan transfonnan.

Item Type:	Monograph (Project Report)
Uncontrolled Keywords:	kloning, Bacillus subtilis subsp. spizizenii str. W23, ysdC, BSUW23_ l0175, xynB
Subjects:	Q Science > QH Natural history > QH301 Biology
Depositing User:	Eko Setiawan 194014
Date Deposited:	10 Jun 2015 08:29
Last Modified:	05 Nov 2020 08:12
URI:	http://repository.ubaya.ac.id/id/eprint/24589

Actions (login required)

View Item